北京N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶

OglyZOR 来源于口腔链球菌，在大肠杆菌中表达。该酶含有 His 标签，分子量为 227 kDa。SialEXO来源于Akkermansia muciniphila，在大肠杆菌中表达。SialEXO酶含有His标签，组分的分子量分别为42 kDa和66 kDa。1.高效O-糖苷酶；2. 降低样品异质性，揭示潜在的关键蛋白质修饰；3. 完全、稳健地去除 O-糖he心 1 二糖。Genovis的冻干酶，用于水解糖蛋白上的he心1 O-聚糖。OglyZOR 冻干剂以冻干粉的形式提供，装在 2000 个单位的小瓶中，用于在 2 mg 糖蛋白上水解he心 1 O-聚糖。它需要去除唾液酸助剂才能发挥作用，因此与2000单位的SialEXO冻干一起提供。上海倍笃生物科技有限公司（简称“倍笃生物”）代理Genovis的IdeS酶等。北京N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶

与PNGase F类似，Genvois的OmniGLYZOR用于携带N-和简单O-糖的糖蛋白的去糖基化。 OmniGLYZOR 试剂盒包括：OmniGlyZOR 微离心柱；PNGase F 冻干；RapiGest™* SF表面活性剂。除非底物蛋白变性，否则某些 N-糖基化位点很难或无法被 PNGase F 接近。在OmniGLYZOR Microspin柱上孵育后剩余的N-糖可以在变性条件下使用试剂盒中包含的PNGase F冻干和RapiGest™ SF表面活性剂通过额外的去糖基化步骤去除。使用Genovis的OpeRAT对EPO进行O-糖位点特异性消化：对于jin携带一个或几个 O-糖基化位点的简单底物蛋白，OpeRATOR 也可用于绘制中间水平的 O-糖基化位点。 江西冻干粉形式PNGaseF去糖基化酶蛋白质组学研究GalactEXO微离心柱经过格式化，可在30-60分钟内水解0.5mg糖蛋白中的半乳糖。

使用Genovis的GalNAcEXO 对 O-糖基化生物制药进行 Tn 抗原表征：未成熟的截短O-聚糖导致了复杂生物制药的异质性，使其分析更具挑战性。 O-聚糖的he心由n-α-GalNAc残基组成，通过糖苷键与丝氨酸或苏氨酸连接，称为Tn抗原。 现在，使用GalNAcEXO可以采用合适的酶策略来去除这些GalNAc并简化生物制药的表征。在质谱图中可以观察到重复峰的模式。其次，在与GalNAcEXO酶孵育后，剩余的GalNAc残基被完全去除，留下一个峰。因此，该工作流程确认了 O-糖基化生物制药上存在 Tn 抗原，并允许定量he心 GalNAc 水平。这种工作流程的另一个好处是减少了剩余的异质性，这有助于确认蛋白质的完整质量，并揭示截短的片段。

与PNGase F类似，Genvois的OmniGLYZOR 水解 N-和粘蛋白型 O-聚糖：糖基化往往是异质的，这使得对高度糖基化的生物zhiliao药物的分析具有挑战性。完整质量数的确认以及其他产品质量属性的表征受到不同糖型复杂性的阻碍，这就是为什么有效的聚糖去除工具简化了此类分析的原因。 虽然 N-聚糖包含一个共同的结构，并且可以通过 PNGase F 整体去除，但粘蛋白型 O-聚糖在结构上更加多样化，具有多个不同的he心。OmniGLYZOR含有固定化酶的混合物，能够依次分解O-聚糖，以完全去除最常见的O-聚糖结构（二唾液酸和单唾液酸基he心1和Tn抗原）。OmniGLYZOR 水解 N-和粘蛋白型 O-聚糖。

Genovis的FucosEXO 是 α-岩藻糖苷酶的混合物，用于有效水解天然 N-和 O-糖基化蛋白或游离寡糖上的 α1-2、α1-3 和 α1-4-连接岩藻糖残基。它是 N-和 O-糖蛋白的聚糖结构分析以及寡糖的外切糖苷酶阵列的宝贵工具。1. 高效α-岩藻糖苷酶混合物 – 快速去除 α1-2、α1-3 和 α1-4-连接的岩藻糖；2. 可靠的酶解增加了对外切糖苷酶阵列的信心；3. 可固定在即用型离心柱中。用于糖蛋白去氟糖基化的冻干酶。Genovis的FucosEXO冻干剂以冻干粉的形式提供，装在2000单位的小瓶中，用于2mg糖蛋白的去碳基化。曲妥珠单抗中半乳糖损失的LC-MS数据，进行了释放的N-聚糖分析。北京冻干粉形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

可以用8M尿素进行洗脱；或使用活性OpeRATOR酶进行洗脱。北京N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶

由于蛋白质的O-糖模式的异质性和O-糖结构的OpeRATOR特异性，形成了重叠的肽，从而可以获得O-糖位点的完整图谱为了进行比较，相同材料的标准胰蛋白酶消化物， 显示难以分析的少量且非常大的糖肽。使用Genovis的OpeRATOR进行O-糖位点定位：OpeRATOR 是一种 O-聚糖特异性蛋白酶，可消化丝氨酸和苏氨酸糖基化位点的粘蛋白型 O-糖蛋白 N 端。这会产生携带O-糖的糖肽，并能够使用质谱法进行O-糖分析、O-糖肽图谱以及中级分析。下面是OpeRATOR消解位点的示意图。北京N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶